利用铕荧光时间分辨免疫测定法

精确定量未纯化样本中的外泌体

作用原理

第一步

生物素化(Biotinylated)的抗体附着于链霉亲和素(streptavidin)涂层板上。

第二步

加入样本。外泌体及其他样本中的抗原(CD9/CD63/CD81)被抗体捕捉。

第三步

加入铕标记的抗体。铕标记的抗体有特异性，会与外泌体上的抗原结合。已经被第二步加入的抗体占据的单体表位不会被侦测到。以时间分辨荧光分析仪观察结果。

ExoLISA™ 检测是时间分辨免疫荧光检测，旨在快速测量尿液、唾液、脑脊液 (CSF)、血浆以及细胞培养基等生物体液中与外泌体特异性相关的 CD9、CD63 或 CD81 蛋白的丰度。ExoLISA™ 检测分析是检测纯化或未纯化样本中外泌体特异性标记的理想选择。

实验数据

纵轴：平均时间分辨荧光计数

横轴：外泌体样本（μg）

以稀释的外泌体样本做试验。外泌体数量与时间分辨荧光计数在大范围内呈线性关系。

CD9 ExoLISA™试剂盒可用于检测多种细胞系的外泌体，对于人源样本有特异性。来源于狗的 MDCK 和小鼠 B16 细胞系则测不出数据。

20 个尿液样本的 EXOLISA™外泌体分析显示样本之间的 CD9 含量存在很大差异。

订购信息

参考文献：

The below references are for the TRIFic™ assay(earlier version of ExoLISA™).

l   Vitale,S.R., Helmijr, J.A., Gerritsen, M. et al. (2021) Detection of tumor-derivedextracellular vesicles in plasma from patients with solid cancer. BMCCancer 21, 315.

l   Vergauwen,G., Tulkens, J., Pinheiro, C. et al. (2021) Robustsequential biophysical fractionation of blood plasma to study variations in thebiomolecular landscape of systemically circulating extracellular vesiclesacross clinical conditions. Journal ofExtracellular Vesicles, 10, e12122.

l   Salarpour,S., Forootanfar, H., Pournamdari, M. et al. (2019) Paclitaxelincorporated exosomes derived from glioblastoma cells: comparative study of twoloading techniques. DARUJournal of Pharmaceutical Sciences 27, 533–539.

l   Kaminska,A., Platt, M., Kasprzyk, J. et al. (2016) UrinaryExtracellular Vesicles: Potential Biomarkers of Renal Function in DiabeticPatients. Journalof Diabetes Research Volume 2016, Article ID 5741518.

可测定样本中外泌体

• 血浆
• 培养基
• 尿液
• 其他生物性液体