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A答:传统胰酶一般取自猪的胰脏,胰脏中除了胰蛋白酶,还有其他蛋白酶,产品不可避免的会有其他杂质,即纯度不能保证。与传统提取的胰蛋白酶比较,重组胰蛋白酶具有的产品优势如下:
1) 无动物源性:基因重组胰酶是由重组大肠杆菌表达生产,产品不含任何动物来源组分。
2) 纯度高:无其它的杂酶污染。
3) 稳定:室温下即可稳定保存,无需冷冻。 
4) 作用更加温和。

A答:不同胰酶产品中含有的组分或含量存在差异,应对不同研究需要时,需要参考相关资料进行使用。
1) 胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞,如胚胎、上皮、肝、肾等组织,但对纤维性组织和较硬的癌组织的效果差。
2) 胰酶的消化效果主要与pH值、温度、时间、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关,也与细胞本身有关。

A答:1)胰酶产品为冷冻保存,在运输过程需要加入干冰。当干冰气化后形成气相的CO2,可能会与胰酶产品中CO2发生气体交换,影响瓶内的pH变化,含酚红的胰酶溶液可能会发黄或橘黄。VivaCell胰酶产品在运输时会使用塑料包装袋单独包装,与干冰隔开以减少CO2的交换。
2)多数胰酶产品正常保存温度为-20℃,如果将产品存放在-80℃或更低温的环境下,含酚红的胰酶产品颜色会变黄或橘黄。另外部分胰酶溶液中含有磷酸盐体系也会因为低温保存时变黄色,但在解冻后可恢复正常。
经验证,以上两种因低温保存导致胰酶产品颜色的变化,这种产品变化是行业的普遍现象,在其它品牌的胰酶产品中均会出现。各品牌也都对此现象进行了测试实验[1],变黄的胰酶产品用于细胞解离的效果基本没有变化,请放心使用。VivaCell也对上述两种原因导致的胰酶产品发黄进行细胞试验测试,结果显示,发黄或橘黄色的胰酶产品pH值仍在出厂质检范围内,细胞消化效果与正常颜色的胰酶产品基本一致,细胞状态良好。
3)如果已经开封的胰酶消化液发生颜色变化,可能是频繁开盖取液导致pH变化,或多次加热也会导致胰酶活性下降。如果消化效果变差,建议重新开启一瓶使用,后续可以根据研究需要进行分装保存使用。

A答:多数胰酶产品有含/不含酚红两大种类,根据研究需要选择合适的胰酶产品。
1) 酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。
2) 研究表明:酚红可以模拟固醇类激素(特别是雌激素)的作用。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,建议用不含酚红的培养基。由于酚红干扰检测,在做流式细胞检测时,也会使用不含酚红的胰酶。

A答:一般肉眼观察贴壁细胞层,多半细胞呈沙状移动,或大部分已经脱落,就可以停止消化。
A答:多次使用同一瓶胰酶且反复冻融,会降低消化效果并有可能造成污染,因此有必要对胰酶进行分装。胰酶分装时遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则,避免在冷冻保存时,试剂体积膨胀导致容器破损而造成污染。
A答:以下原因供参考:
1) 消化时间不够。
2) 吹打力度不够。
3) 胰酶消化液浓度不够。
4) 胰酶保存不当导致失效。
5) 细胞融合度高,传代时机太晚。

A答:Annexin V(膜联蛋白)是Ca2+依赖的蛋白,EDTA会螯合Ca2+从而影响Annexin V,进而影响结果,因此选用不含EDTA的胰酶。
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