A答:大多数品牌的血清产品均会含有沉淀物,肉眼可见或不可见,血清沉淀的发生多数情况无法控制,其沉淀量也很难预估,需要科研人员正确保存与使用血清产品。
1) 血清中的沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),脂蛋白,冷凝集素,玻连蛋白,胎球蛋白[1],磷酸钙(显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。
2) 造成沉淀的原因主要有:热灭活血清;反复冻融;长期储存在2-8℃;室温或37℃水浴锅中融化;伽马辐射;在室温下放置时间过长。
3) 预防/处理措施:建议将血清分装后放置在-20℃保存;避免反复冻融;将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱使之全融(间断摇晃均匀),待全部溶解后再分装;如有沉淀,建议400 x g离心5 min,取上清使用。我们不建议对有沉淀物的血清产品进行过滤去除,一方面可能会堵住滤膜;另一方面过滤可能会导致血清中一些营养物质的流失,导致细胞培养效果降低。
(参考文献:[1] Didier Raoult, Patricia Renesto et al. PLoS Pathogens. 2008 Feb., 4(2): e41.)
关于血清沉淀是否会影响细胞生长,我们的经验以及客户的测试发现血清沉淀物不会影响细胞的培养,其它血清生产商也证明了这一说法。