A答：选择基础培养基有几点建议可供参考：
1) 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅ATCC 或在购买细胞株时咨询供应商。
2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。
3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。
4) 用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择最佳培养基，这是客观的方法，但比较繁琐。

A答：一般在基础培养基中添加了血清和抗生素等成分后，建议避光保存在4℃冰箱且在两周内用完。因为一些抗生素和血清的基本成分在解冻后就开始降解，完全培养基存放时间越长，培养质量越不能保证。

A答：普通的基础培养基放置在2-8℃冰箱避光保存，若已开封建议两周内使用完，避免频繁从大瓶中取液。未开封的培养基，一般在2-8℃可稳定保存1年。

A答：细胞发生支原体或黑胶虫污染可以作鉴别诊断。支原体污染细胞后可以结合相关特征与方法学检测可以定性，但目前对黑胶虫没有明确定论，需要结合黑胶虫污染细胞的特征进行正确处理。
1) 污染严重的细胞培养物请直接加入消毒液或酒精处理后带出细胞房丢弃。
2) 如果污染程度较低，细胞状态一般，或者细胞珍贵，可以采取挽救措施。向完全培养基中加入支原体清除试剂（货号：C3470+C3471；或C3472）或黑胶虫清除试剂（货号：C3470+C3471+C3423；或C3472+C3423）培养，正常培养与传代观察细胞状态。另外在传代时提高细胞接种密度，让细胞成为孔板中的“优势群体”。待处理1-2个周期后未见污染物，可做支原体污染鉴定，鉴定为支原体阴性且细胞恢复正常状态后可继续开展相关研究。

A答：细胞培养发生细菌或真菌污染比较常见，需要我们根据污染程度和细胞状态进行正确处理。
1) 污染严重的细胞培养物请直接加入消毒液或酒精处理后带出细胞房丢弃。
2) 如果污染程度较低，细胞状态一般，或者细胞珍贵，可以采取挽救措施。使用双抗或三抗进行清洗和培养，提高双抗或三抗的比例，一般是5-10%，正常培养与传代观察细胞状态。另外在传代时降低细胞接种密度，也是减少污染物的接种。待传代2-3代未见污染物后，可做相关细胞功能鉴定，细胞恢复正常状态后可继续开展相关研究。
其中细胞发生真菌污染相对较难清除干净，或者清除不彻底容易污染他人细胞或环境，非必须挽救细胞请直接处理培养物，并对环境、设备、操作台面等进行清洁消毒。另外细胞发生细菌污染也尽量查找出源头，比如个人操作、环境、公共试剂等，正确处理与预防。

A答：先用酒精清洁擦拭，然后使用灭菌喷壶（VivaCell 货号：C3490）喷洒消毒，可有效预防真菌（和孢子）、细菌（和芽孢）、支原体和病毒的生长和污染。Aquaguard-1是多功能性，即用型的浓缩溶液，可有效消毒培养箱中的水盘。将其稀释100倍即可使用，即将10 mL Aquaguard-1溶液加至1 L水中，倒入培养箱的水盘。每2-4 周更换一次水盘中的无菌水。

A答：如果确定是支原体污染，可以不加双抗/三抗；如果用于预防污染（如普通细胞培养或是原代细胞分离），可以添加支原体处理试剂和双抗/三抗。

A答：两种消毒剂具有广谱抗菌活性，对不锈钢无腐蚀性，按照说明书正确操作。
1) Aquaguard-1的建议浓度：按照1:100无菌水稀释。CO2培养箱使用的水是重要的污染源，一旦发生微生物污染，建议将50 mL Aquaguard-1溶液加至5 L水中，每2-4周更换一次培养箱中的无菌水。
2) Aquaguard-2的建议浓度：按照1:500无菌水稀释。将2 mL的Aquaquard-2浓缩液加入到1 L水中，放置于水浴锅，建议1-2周更换一次。